流式细胞仪测细胞周期的方法

应用于流式细胞仪测细胞周期的方法,不同实验室都有自己的protocol,总的来说大同小异。


以下提供一个我们自己的实验步骤供参考:


(1)200×g离心10min收集细胞;

(2)弃去上清,PBS漂洗一次,将细胞重悬于预冷的80%乙醇中,-20°C固定24h以上;

(3)进行流式细胞仪检测前,200×g离心10min收集固定后的细胞;

(4)PBS洗涤一次,200×g离心10min收集细胞;

(5)将细胞重悬于含100ug/ml RNase A50ug/ml PI 的PBS中,室温孵育30min;

(6)将经 PI 染色和 RNase A消化后对的细胞悬液用 300目的尼龙膜过滤后即可利用流式细胞仪进行细胞周期分布和凋亡细胞定量的分析。



RNase A 推荐novoprotein的M018-01A

PI推荐antgene的ANT007