InvivoGen核酸转染增强剂:NATE™

NATE™ 是InvivoGen 设计的一种核酸转染增强剂,用于提高难以转染细胞的瞬转与稳转效率;特别是人类单核细胞(THP-1)与小鼠巨噬细胞(RAW 264.7 ),且只需在平时加转染试剂前 30 分钟加入 NATE™即可。值得注意的是, NATE™对细胞温和,不会对细胞培养产生任何进一步的毒性。

在真核细胞转染过程中,外源性核酸(即质粒)的主要障碍是AIM2炎性会被胞质传感器检测,如cGAS/STING、AIM炎性小体和LC3介导的自噬。这些防御信号级联的激活尝尝会极大地影响瞬时和稳定转染的效率,特别是在难转染的细胞(如免疫细胞)中会更明显。当使用 NATE™ 时,这些核酸传感通路将被抑制,从而在转染过程中保护质粒并促进其表达。


NATE™ 的主要特点:

1)与常用转染试剂(例如 GeneXPlus、Lipofectamine® LTX 和 jetPRIME®)及物理方法兼容(例如核转染)。

2)更高的转染率,即使是大质粒 (> 10kb)。

3)在所有测试的转染方案中都显示对细胞温和,无毒性。


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上图:利用Lipofectamine®LTX将GFP质粒(~3kb)瞬时转染到THP-1细胞中,48小时后,荧光显微镜下观察,使用NATE™后转染效率明细增加。

下图:利用Lipofectamine®LTX, jetPRIME®,FuGENE®和nucleofector等常用转染方法,将~3kb质粒(左)和~8kb质粒(右)瞬时转染至THP-1细胞。48小时候,用流式细胞术检测转染效率,与不使用NATE™转染相比,数据有倍数变化。


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上图:利用Lipofectamine®LTX将GFP质粒(~3kb)瞬时转染到RAW 264.7细胞中,48小时后,荧光显微镜下观察,使用NATE™后转染效率明细增加。

下图:利用Lipofectamine®LTX, jetPRIME®,FuGENE®和nucleofector等常用转染方法,将~3kb质粒(左)和~8kb质粒(右)瞬时转染至RAW264.7细胞。48小时候,用流式细胞术检测转染效率,与不使用NATE™转染相比,数据有倍数变化。

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使用lipofectamine LTX 试剂将约10kb SEAP(分泌型碱性磷酸酶)表达质粒稳定转染至RAW 264.7细胞中(左图:没有使用NATE™ ,右图:使用NATE™ )。10天后,使用SEAP检测试剂QUANTI-BlueTM观察表达SEAP的稳定克隆数(蓝色),使用NATE™ 转染的SEAP稳定表达克隆数量增加。



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