RIP Assay Kit

来源：MBL

MBL开发并销售RIP Assay Kit, 此试剂盒利用针对RBP(RNA结合蛋白）的抗体，可以对RBP与mRNA的复合物（mRNP）进行免疫沉淀（RIP）,还可以对RBP上结合的mRNA进行全面性分析。


◎最适合RIP-Assay使用的缓冲液套装。

◎不使用苯酚，采用独有的高产率RNA提取试剂，因此没有废弃物困扰。

◎可以高产率、高品质的回收适用于各种RIP-Assay后分析的RNA


RIP-Assay Kit 实施示例

细胞: Jurkat

细胞计数: 1 x 106 cells/sample

抗体: Normal Rabbit IgG

　　   Anti-PTBP1 (Human) pAb (RN011P)

抗体使用量: 15 µg


1.用WB确认，经免疫沉淀后的RNP

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2．用NanoDrop确认分离得到的RNA的量

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3.对分离得到的RNA进行解析

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4.用RT-PCR对分离得到的RNA进行鉴定

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Jurkat细胞内，与PTBP1结合的RNA经RIP-Assay Kit分离后，利用基因特异引物对其进行RT-PCR鉴定。检出了CD40LG等、在文献中确认过的PTBP1结合RNA。利用RIP-Certifiled Anti PTBP1 Antibody免疫沉淀后得到的样品中，检测出了利用normal rabbit IgG免疫沉淀的样品中检测不到的CD40LG。由此可以证明，RIP-Assay Kit适用于对RNP复合物中结合的mRNA进行分型。