血清类产品常见问题和解决办法

1. 血清的外观颜色说明:

每一个批次的血清外观颜色可能有所变化,它们的颜色可能是金黄色、红色、琥珀棕色或者是介于三者之间。



2.保存血清最好的方法:

我们建议将血清保存在-5℃至-20℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一 瓶,建议您将血清无菌分装至合适体积的灭菌容器内,再放回冷冻箱保存。



3. 如何解冻血清才不会使产品质量受损?

我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱过夜融解,然后在室温下使之全融。必 须注意的是,融解过程中需要规则地摇晃均匀。



4. 血清解冻后发现有絮状物出现,该如何处理?

血清中絮状物的出现有许多种原因,最普遍的原因是血清中脂蛋白的变性;血纤维蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,也是造成絮状物的主要原因之一。这些 絮状物的产生不会影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以 400g 离心力短暂离心,再 将离心后的上清液加入培养基内一起过滤。我们不建议您直接过滤血清以去除这些絮状物,因 为它可能会阻塞过滤膜。



5. 为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?

胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白(如冷凝集素、纤维蛋 白原、玻粘连蛋白等)和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊物。这些沉淀的产生不会影 响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。



6. 如何避免沉淀物的产生?

我们建议您在使用血清的时候,注意下列操作:

• 解冻血清时,请按照上述逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时温度变化 太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。

• 解冻血清时,请随时轻轻地将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。

• 请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较 不稳定的成分也会因此受到损害,影响血清的质量。

• 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,无需做此步骤。

• 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃、30 分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过 高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。



7. 为什么要热灭活血清?

加热可以灭活补体系统。启动的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩, 细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。 在免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。



8. 有必要对血清都进行热灭活吗?

实验显示,热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有 微小的促进,或完全没有任何作用,甚至可能因为高温处理影响了血清的质量,造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物会显著地增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉 淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。 因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热灭活处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵 的时间,更确保血清的质量!



9. 如何正确地进行血清灭活?

热灭活时请将血清置于 56℃水浴30 分钟。为尽量减少热灭活对血清品质的影响,一次灭活的血清体积不宜过大。最好准备同样的容器装相等体积的水(与血清相同温度),灭活时将装有血清和水的容器同时放入56℃水浴, 在装水的容器中放置温度计,加热过程中不时轻轻旋转混 匀血清,当温度计显示达到56℃左右,开始计时。



10. 为什么血清的细胞培养效果有批号差异,如何尽量避免批号差异性?

因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不确定 的,批间差异是可能存在的。我们对每一个批号的血清产品都会进行以下三项重要的性能测 试,即:克隆形成率、平板接种效率和二倍体成纤维细胞生长促进性能。这些试验可确保我们 为您选择的每批胎牛血清在您的培养体系中产生最佳的效果。


我们建议您在购买血清的时候,

•   如果某一个批次血清使用效果较好,建议您记住这个批号,订货的时候给予注明。如果您冷 冻室有足够的空间,建议您可以一次购进多瓶同批次的血清(血清的保存时间通常为3-5年, 建议您一次购买足够使用1年以上的用量),以减少由于批次的差异对您实验的影响。

•   如果需要换不同批号的血清,并且细胞对血清批次比较敏感,建议提前查询不同批次产品的 COA文件,比较克隆形成率、平板接种效率和二倍体成纤维细胞生长促进性能测试结果是否 接近。

•   如果换用不同产地的血清,建议您先订购一瓶试用,试用成功之后再大量订购该批号血清。


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